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開發pDMAEMA與光敏感性pONBMA兩性高分子共聚物做為基因載體 =...
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林彥宏
開發pDMAEMA與光敏感性pONBMA兩性高分子共聚物做為基因載體 =Development of Photosensitive pDMAEMA-co-pONBMA Amphiphilic Copolymers for Gene Delivery Vectors /
紀錄類型:
書目-語言資料,印刷品 : Monograph/item
正題名/作者:
開發pDMAEMA與光敏感性pONBMA兩性高分子共聚物做為基因載體 =/ 林彥宏
其他題名:
Development of Photosensitive pDMAEMA-co-pONBMA Amphiphilic Copolymers for Gene Delivery Vectors /
其他題名:
Development of Photosensitive pDMAEMA-co-pONBMA Amphiphilic Copolymers for Gene Delivery Vectors
作者:
林彥宏
出版者:
[高雄市]: [撰者], : 民110,
面頁冊數:
90葉 :圖 ; : 30公分;
附註:
指導教授: 王麗芳.
提要註:
非病毒基因傳遞載體由於其可調節的轉染效率和易於放大的特點而倍受關注。在此,以各種比例的2-nitrobenzyl methacrylate (ONBMA) 與2-(dimethylamino)ethyl methacrylate (DMAEMA) 和少許的poly(ethylene glycol) methyl ether methacrylate (PEGMEMA) 合成了稱為ODPs的光敏感共聚物。其中ONBMA是光敏感且疏水的單體,DMAEMA是陽離子和親水性單體,而PEGMEMA可改善ODPs形成的顆粒在血液中的循環穩定性。首先,使用自由基聚合成功地合成了ODPs,並根據1H-NMR譜圖計算了每個鏈段的摩爾比,再用凝膠滲透色譜法 (Gel Permeation Chromatography) 測量ODPs的分子量。其次, ODPs在水溶液可以形成微胞粒子,並使用透射電子顯微鏡 (TEM) 和動態光散射 (DLS) 觀察粒子的形態和尺寸。第三,將微胞粒子與質粒DNA進一步複合作為基因複合體。通過DNA電泳測定DNA在多鏈體中的保留能力。為了評估在紫外線照射下DNA釋放是否持續增強,利用365nm紫外線燈照射基因複合體,並使用電泳膠觀查DNA的釋放情形。最後,使用MTT測定法評估了ODP的細胞毒性,在4株細胞測試結果,都顯示出ODP對細胞株具微不足道的毒性。在有或沒有UV光的輔助下,測試了複合物的綠色螢光蛋白 (GFP) 的表達,結果顯示基因複合體經UV照射3分鐘具更好的螢光蛋白的表達量。基因複合體的內在化將通過ImageJ定量後進一步評估。.
電子資源:
電子資源
館藏註:
(平裝)
開發pDMAEMA與光敏感性pONBMA兩性高分子共聚物做為基因載體 =Development of Photosensitive pDMAEMA-co-pONBMA Amphiphilic Copolymers for Gene Delivery Vectors /
林彥宏
開發pDMAEMA與光敏感性pONBMA兩性高分子共聚物做為基因載體 =
Development of Photosensitive pDMAEMA-co-pONBMA Amphiphilic Copolymers for Gene Delivery Vectors /Development of Photosensitive pDMAEMA-co-pONBMA Amphiphilic Copolymers for Gene Delivery Vectors林彥宏 - [高雄市]: [撰者], 民110 - 90葉 :圖 ;30公分
指導教授: 王麗芳.
碩士論文--高雄醫學大學醫藥暨應用化學系碩士班.
參考書目: 葉.
目錄
非病毒基因傳遞載體由於其可調節的轉染效率和易於放大的特點而倍受關注。在此,以各種比例的2-nitrobenzyl methacrylate (ONBMA) 與2-(dimethylamino)ethyl methacrylate (DMAEMA) 和少許的poly(ethylene glycol) methyl ether methacrylate (PEGMEMA) 合成了稱為ODPs的光敏感共聚物。其中ONBMA是光敏感且疏水的單體,DMAEMA是陽離子和親水性單體,而PEGMEMA可改善ODPs形成的顆粒在血液中的循環穩定性。首先,使用自由基聚合成功地合成了ODPs,並根據1H-NMR譜圖計算了每個鏈段的摩爾比,再用凝膠滲透色譜法 (Gel Permeation Chromatography) 測量ODPs的分子量。其次, ODPs在水溶液可以形成微胞粒子,並使用透射電子顯微鏡 (TEM) 和動態光散射 (DLS) 觀察粒子的形態和尺寸。第三,將微胞粒子與質粒DNA進一步複合作為基因複合體。通過DNA電泳測定DNA在多鏈體中的保留能力。為了評估在紫外線照射下DNA釋放是否持續增強,利用365nm紫外線燈照射基因複合體,並使用電泳膠觀查DNA的釋放情形。最後,使用MTT測定法評估了ODP的細胞毒性,在4株細胞測試結果,都顯示出ODP對細胞株具微不足道的毒性。在有或沒有UV光的輔助下,測試了複合物的綠色螢光蛋白 (GFP) 的表達,結果顯示基因複合體經UV照射3分鐘具更好的螢光蛋白的表達量。基因複合體的內在化將通過ImageJ定量後進一步評估。.
(平裝)Subjects--Index Terms:
o-硝基苯甲醇
開發pDMAEMA與光敏感性pONBMA兩性高分子共聚物做為基因載體 =Development of Photosensitive pDMAEMA-co-pONBMA Amphiphilic Copolymers for Gene Delivery Vectors /
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非病毒基因傳遞載體由於其可調節的轉染效率和易於放大的特點而倍受關注。在此,以各種比例的2-nitrobenzyl methacrylate (ONBMA) 與2-(dimethylamino)ethyl methacrylate (DMAEMA) 和少許的poly(ethylene glycol) methyl ether methacrylate (PEGMEMA) 合成了稱為ODPs的光敏感共聚物。其中ONBMA是光敏感且疏水的單體,DMAEMA是陽離子和親水性單體,而PEGMEMA可改善ODPs形成的顆粒在血液中的循環穩定性。首先,使用自由基聚合成功地合成了ODPs,並根據1H-NMR譜圖計算了每個鏈段的摩爾比,再用凝膠滲透色譜法 (Gel Permeation Chromatography) 測量ODPs的分子量。其次, ODPs在水溶液可以形成微胞粒子,並使用透射電子顯微鏡 (TEM) 和動態光散射 (DLS) 觀察粒子的形態和尺寸。第三,將微胞粒子與質粒DNA進一步複合作為基因複合體。通過DNA電泳測定DNA在多鏈體中的保留能力。為了評估在紫外線照射下DNA釋放是否持續增強,利用365nm紫外線燈照射基因複合體,並使用電泳膠觀查DNA的釋放情形。最後,使用MTT測定法評估了ODP的細胞毒性,在4株細胞測試結果,都顯示出ODP對細胞株具微不足道的毒性。在有或沒有UV光的輔助下,測試了複合物的綠色螢光蛋白 (GFP) 的表達,結果顯示基因複合體經UV照射3分鐘具更好的螢光蛋白的表達量。基因複合體的內在化將通過ImageJ定量後進一步評估。.
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Non-viral gene delivery vectors are of particular interest due to their tuneable transfection efficiency and easy scale-up. Here, photosensitive copolymers named as ODPs were synthesized with various ratios of 2-nitrobenzyl methacrylate (ONBMA), 2-(dimethylamino)ethyl methacrylate (DMAEMA), and poly(ethylene glycol) methyl ether methacrylate (PEGMEMA), where ONBMA is a light-sensitive and hydrophobic monomer; DMAEMA is a cationic and hydrophilic monomer and PEGMEMA improves the circulation stability of ODP-formed particles in the bloodstream. First, ODPs were successfully synthesized using free radical polymerization and the molar ratios of each segment were calculated from 1H-NMR spectra. Molecular weights of ODPs were measured with a gel permeation chromatography (GPC). Secondly, the ODPs could be formulated into micelles in an aqueous solution and morphologies and sizes of the micelles were observed using a transmission electron microscope (TEM) as well as dynamic light scattering (DLS). Thirdly, the micelles were further complexed with plasmid DNA as a gene delivery vector. The retention ability of DNA in polyplexes were assayed by DNA electrophoresis. To evaluate whether DNA release is sustainably enhanced under UV-light irradiation, the polyplexes were irradiated using a 365nm UV lamp for several time points and a DNA release was observed by electrophoresis gel. Lastly, cytotoxicity of ODPs was evaluated with the MTT assay, showing insignificant toxicity against four cell lines. The expression of green fluorescent protein (GFP) of the polyplexes was tested with and without an assistance of UV light. The results showed that the highest green fluorescent expression was found in the cells exposed to the polyplex with 3-min UV light irradiation. Internalization of the polyplexes will be further evaluated by ImageJ quantification..
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微胞.
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Micelles
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